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熱穩定無機焦磷酸酶

產品編號 產品名稱 規格 價格(元) 說明書
C5007A 熱穩定無機焦磷酸酶 200U 300
C5007B 2,000U 2,000
熱穩定無機焦磷酸酶純化自重組 E. coli 菌株,攜帶從極度耐熱的 Thermococus litoralis 中克隆的無機焦磷酸酶基因。該焦磷酸酶催化無機焦磷酸鹽水解生成正磷酸鹽。 P207–4 + H20 →2HP04–2。該酶在100℃加熱4h仍然具有100%活性,因此可用于PCR反應,解除生成的無機焦磷酸鹽對PCR的抑制,增強DNA的復制。

組分

組分名稱 數量
Thermostable Inorganic Pyrophosphatase (2 U/μl) 100 μl/1 ml

活性定義

1單位指標準反應條件下:0.5ml反應體系,50mM Tricine pH8.5,1mM MgCl2和0.32mM PPi,75℃反應10 鐘,每分鐘催化無機焦磷酸鹽生成1μmol 磷酸鹽的酶量。

儲存

-20℃可保存3年。

使用注意事項

(1) 該酶在多種反應Buffer中均具有活性,通常該酶在tHDA擴增、PCR、測序反應等實驗中,可直接接入即可。
(2) 該酶的用量在不同的實驗中需要優化,通常在5~50U/ml濃度調整。
(3) 該酶不可以熱失活。

實例

熱穩定無機焦磷酸酶
Fig:以Bst2.0擴增的LAMP產物作為底物,分別應用不同量的熱穩定無機焦磷酸酶在65℃作用1h,肉眼觀察管內變化。管1為不加Bst 2.0 DNA 聚合酶的LAMP產物,管2為Bst 2.0 DNA聚合酶的LAMP擴增產物,管3-7為在管2產物中分別加入不同量熱穩定無機焦磷酸65℃作用1h的產物。其中管3-7加入的焦磷酸酶的量分別為:0.1μl、0.25μl、0.5μl、0.75μl和1μl。
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