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Rnase Free DNase I

產品編號 產品名稱 規格 價格(元) 說明書
D3001 Rnase Free DNase I(with Rnase Inhibitor) 1000U 300 Dnase I說明書
10KU 2,000
Rnase Free DNase I是將單鏈或雙鏈 DNA 同等程度的隨機分解,生成具有 5′-P 末端寡核苷酸的脫氧核糖核酸內切酶。由于RNase-free DNase I中Protease已幾乎被完全去除,從而提高了該酶在 pH 中性區域的穩定性。此外Rnase Free DNase I中添加了Rnase Inhibitor,用于抑制RNA樣品中殘留的RNase核酸酶,因此可以有效抑制RNA提取過程中Rnase酶對RNA的降解。Stop Buffer終止反應后,可通過一步加熱失活DNase I活性。

單位定義

以小牛胸腺 DNA 為底物,在 25℃、pH5.0 的條件下,1 分鐘內使反應液的 260 nm 吸光度增加 0.001 所需要的酶量定義為 1 個活性單位(Kunitz Unit)。

組分

名稱 數量
*Rnase Free DNase I (10 U/μl) 100μl
10×RD Buffer 500μl
10× RD Stop Buffer 500μl

*Rnase Free DNase I (10 U/μl)中含有20U/μl的Rnase Inhibitor,故進行消化試驗時不需要再額外添加Rnase Inhibitor。

純度

10 U的本酶和1μg的16S, 23S rRNA在37℃、pH7.5的條件下反應1小時,RNA的電泳譜帶不發生變化

儲存

置于-20°C,可保存3年。

使用注意事項

1)通常加熱方法即可失活DNase I。如需要去除殘留的變性蛋白,可在37°C消化完畢后使用酚氯仿抽提并沉淀RNA樣品(不進行加熱操作)。
2)10× RD Stop Buffer中含有螯合劑用于去除二價陽離子,進行加熱失活前,必須加入5 μl 10× RD Stop Buffer并混合均勻,再進行熱失活,否則會導致RNA降解。
3)處理完畢的RNA樣品進行一步反轉錄反應時,添加量需要<20%(如20μl的反轉錄體系中加入量要<4μl)
 
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